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我們在使用細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞時出現(xiàn)的問題，無非是細(xì)胞出現(xiàn)污染和細(xì)胞本身出現(xiàn)了問題，我們在之前的文章中講述了細(xì)胞培養(yǎng)過程出現(xiàn)污染的情況，今天富道細(xì)胞來跟大家介紹一下細(xì)胞本身的兩個問題和解決辦法。

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞表面沾了很多死細(xì)胞，傳代過程中一直存在這種情況呢，富道細(xì)胞有一招百試百靈，那就是用 PBS 洗兩遍之后，加胰酶進(jìn)去，晃一晃，迅速將胰酶倒出，再用 PBS 洗一下，再加胰酶正常消化。死細(xì)胞由于粘附能力很弱，第一次加胰酶進(jìn)去以后會掉下來，第二次加胰酶下來的細(xì)胞才是活性比較強(qiáng)的細(xì)胞。整完一次之后，再次傳代方法同上，一般 2～3 次之后，細(xì)胞就完好如初了。

那在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)時發(fā)現(xiàn)細(xì)胞胞質(zhì)疏松，狀態(tài)不好，根本就養(yǎng)不起來，我們可以從血清下手就行，要么換好血清，要么提高血清濃度，血清濃度提高到 15%～20% 培養(yǎng) 48 h，換成正常 10% 的濃度，用高濃度的血清培養(yǎng)時間過長對細(xì)胞有毒性。

我們在對血清下手之后可以同時采取提高細(xì)胞密度的方法，可以從我們的細(xì)胞培養(yǎng)瓶換到6孔板，12 孔板等，細(xì)胞密度大，細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子多，腫瘤細(xì)胞通過旁分泌途徑促進(jìn)細(xì)胞生長。

針對細(xì)胞胞質(zhì)疏松富道細(xì)胞來跟大家分享一下預(yù)防方法：老化的原因在于細(xì)胞傳代次數(shù)比較多，胰酶消化時間太長，這時候，一定要控制細(xì)胞傳代次數(shù)，注意胰酶消化時間，胰酶消化時間過長，容易導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)不佳以及胞質(zhì)疏松。