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我們?cè)谑褂?a href="http://www.asze.cn/sbgc.html" target="_blank">細(xì)胞工廠時(shí)對(duì)生長到一定程度的細(xì)胞就到了收獲的時(shí)候了，這時(shí)候就需要借助胰酶對(duì)細(xì)胞工廠上的細(xì)胞進(jìn)行消化后再收獲一般使用trypsin-EDTA 濃度為 0.25％ trypsin-0.53 mM EDTA.2Na 或0.05％trypsin-0.02 mM EDTA.2Na。

首先我們先介紹一下胰酶：胰酶儲(chǔ)存的環(huán)境一般在–20°C左右，我們?cè)诮鈨鲆让傅钠毡槭窃?4°C 的環(huán)境中進(jìn)行，我們?cè)诘谝淮伍_瓶后應(yīng)立即將胰酶少量分裝于無菌試管中，并保存于 –20°C環(huán)境中，這種操作是將反復(fù)冷凍解凍造成 trypsin 之活性降低的影響減少，而且這樣的操作流程也會(huì)降低污染的可能。

而我們?cè)诩?xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)胰酶配制也是很重要的一件事濃度過高時(shí)，是很容易造成我們細(xì)胞培養(yǎng)基中細(xì)胞碎片增多、一些黑渣子的增多，所以我們?cè)诔Ｒ?guī)細(xì)胞傳代時(shí)建議用 0.05％ 的胰酶進(jìn)行消化，對(duì)于難消化的細(xì)胞可采用 0.25％ 胰酶進(jìn)行消化，而細(xì)胞工廠的細(xì)胞密度過高超過 80％ 時(shí)，我們可以采用分步消化法。而溶度過低時(shí)消化不足則細(xì)胞難以從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打則會(huì)損傷細(xì)胞活性。因此，控制胰酶消化時(shí)間尤為重要。

當(dāng)然我們?cè)谑褂眉?xì)胞工廠或其他細(xì)胞培養(yǎng)耗材時(shí)不同細(xì)胞對(duì)胰酶消化液的敏感性不同，細(xì)胞對(duì)胰酶消化的時(shí)間也會(huì)有差異。對(duì)于新購買的細(xì)胞，富道細(xì)胞建議我們先用低濃度的胰酶仔細(xì)去摸索一下消化時(shí)間，可每隔 1 分鐘鏡下觀察細(xì)胞是否變圓，記錄最佳消化時(shí)間，下一次操作時(shí)參考之前的記錄來控制時(shí)間即可。
 這就是富道細(xì)胞對(duì)細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)胰酶配制時(shí)的一些說明，希望可以對(duì)各位細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候能起到一定的幫助。